Microscopul Optic

n       Microscopul optic = dispozitiv cu ajutorul caruia se pot examina structuri cu dimensiuni mult sub puterea de rezol 12212t1921m utie a ochiului uman

Componenete microscop optic

n       1.    SURSĂ DE LUMINA

n       2.    CONDENSOR

n       3.    DIAFRAGMĂ

n       4.    MASA

n       DISPOZITIV DE DEPLASARE A LAMEI

n       6.    REVOLVER

n       7.    OBIECTIVE

n       8.    SISTEM DE PRISME

n       9.    OCULAR

n       MACROVIZA

n       MICROVIZA

n       Obiectivul formeaza o imagine marita , reala si rasturnata a obiectului

n       Ocularul- are ca obiect imaginea data de obiectiv si va forma imaginea finala mult marita , rasturnata si virtuala , la infinit deci nu necesita efort de acomodare

Performantele MO sunt :

n       Puterea de marire

n       Puterea de rezolutie

PUTEREA DE MARIRE

n       Puterea de marire = produsul dintre puterea de marire a obiectivului si cea a ocularului

n       Puterea de marire maxima x1500 ori

n       Puterea de marire - ×4, ×10 ;- ×20, ×40 - diagnostic histologic ;- ×60, ×100 - diagnostic citologic

PUTEREA DE REZOLUTIE =Cea mai mica distanta dintre doua puncte la care acestea pot fii percepute distinct

n       De ea depinde claritatea si bogatia īn detalii a imaginii

n       Depinde de lentila obiectivului

n       FORMULA LUI ABBÉ :

n       d=l/ n sinα

n       l= lungimea de unda a radiatiei electromagnetice ( 0,55 µm)

n       n= indicele de refractie al mediului dintre preparat si obiectiv

n       a= ½ din aperura unghiulara a obiectivului

n       l este o constanta naturala ce nu poate fi influentata (0,55)

n       Mediul dintre preparat si obiectiv este de obicei aer (n = 1)

n       Obiectivul cu imersie - intre obiectiv si preparat se interpune o picatura de lichid cu un indice de refractie supraunitar, cum este uleiul de cedru (n=1,51)

n       Apertura unghiulara maxima teoretica este 180 , deci a=90, limita teoretica maxima a sin a

Rezolutia maxima a microscopului optic= 0,2m

STUDIUL CELULELOR VII NECOLORATE

n       1.MICROSCOP CU CĀMP ĪNTUNECAT

n       2. M. CU CONTRAST DE FAZĂ

n       3. M. CU INTERFERENŢĂ

n       4. M. TIP NOMARSKI

n       5. MICROSCOPUL RANVERSAT

n       1.MICROSCOP CU CĀMP ĪNTUNECAT

n       PRINCIPIU - exista un diafragm in condensor care selecteaza doar lumina laterala iar imaginea finala este formata de catre razele reflectate de componentele din preparat

n       2. M. CU CONTRAST DE FAZĂ

n       PRINCIPIU

n       -  lumina care trece prin medii cu indici de refractie diferiti īsi modifica directia si viteza

n       -   micoscopul transforma aceste diferente īn diferente de intensitate luminoasa

n       3. M. CU INTERFERENŢĂ

n       PRINCIPIU

n       - mai foloseste īnca o raza de lumina care nu traverseaza tesutul analizat ,dar interfera cu raza provenita de la sursa de lumina

n       - ofera informatii despre densitatea obiectului analizei

4. M. TIP NOMARSKI

n       Un tip modificat al microscopului cu contrast de faza, oferind imagini aparent tridimensionale

n       5. MICROSCOPUL RANVERSAT

n       - pentru examinarea celulelor din flacoane sau placi Petri

n       - obiective sub masuta

n       - sursa de lumina deasupra

LUMINISCENTA = proprietatea unor substante de a emite lumina atunci cand sunt stimulate       luminos =FOTOLUMINISCENTA

n       FLUORESCENTA - proprietatea unei substante de a emite radiatii lumioase doar in timpul stimularii

n       FOSFORESCENTA -proprietatea unei substante de a emite radiatii lumioase si dupa incetarea stimularii

TERMOFLUORESCENTA = proprietatea unor substante de a emite lumina atunci cand sunt stimulate termic.

Aplicatii practice MICROSCOP CU FLOURESCENTA:

1.AUTOFLUORESCENŢA

b.     Quinacrina - cromozomi = bandare

MICROSOPUL CU FLORESCENTA

IMUNOFLUORESCENŢA : punerea īn evidenta a diferitilor antigeni cu ajutorul unor anticorpi specifici marcati cu un compus fluorescent IZOTIOCIANAT DE     FLUORESCEINA (FITC)

-2 tipuri: directa si indirecta

IMUNOFLOUESCENTA DIRECTA=Ag + Ac specific marcat

IMUNOFLOURESCENTA INDIRECTA Ag + Ac specific + Ac sec. marcat

- are o sensibilitate mai mare ca metoda a-se foloseste in cazul in care antigenele se gasesc in cantitate mica in tesut

n       4.SONDE FLUORESCENTE , molecule care detecteaza concentratia i.c. a ionilor , a rad. liberi , a variatiilor de pH i.c. si isi modifica proprietatile in functie de valorilor acestora.